Problemas associados à realização do projecto

Com o desenrolar do projecto, por inexperiência ou mesmo descuido, fomos sendo confrontados com diversos problemas que dificultaram o desenvolvimento do mesmo:

EXTINÇÃO DE STOCKS

É de extrema importância preservar os stocks de moscas, quantitativamente, dentro de certos valores. No entanto, a necessidade de mudar a papa quinzenalmente, devido à sua rápida degradação, e outros problemas que daí advêm levaram não só à redução do número de indivíduos, mas também à extinção de alguns stocks.

SELECÇÃO DE INDIVÍDUOS VIRGENS

Este é um aspecto de extrema importância na fiabilidade dos cruzamentos. No entanto, no inicio dos cruzamentos cometemos, talvez por ingenuidade ou ignorância, um erro que alterou os resultados que deveríamos obter. Apesar disso, como realizamos sempre um duplicado de cada cruzamento, estes tornaram-se fiáveis.

IDENTIFICAÇÃO DE FENÓTIPO
Esta identificação é, essencialmente, dificultada pela acção de diversas características anatómicas:
A difícil identificação da fusão (no caso dos machos) ou inexistência da mesma (no caso da fêmeas) ao nível dos segmentos abdominais, das moscas, nos stocks black, ebony e brown é uma realidade difícil de contornar devido à semelhança entre a tonalidade dos segmentos abdominais e a tonalidade do corpo dos indivíduos.
De forma semelhante, torna-se, também, difícil distinguir indivíduos dos stocks black e brown, mais uma vez, devido à semelhança existente entre as tonalidades do corpo dos indivíduos. Ainda devido à tonalidade corporal, é importante referir e dificuldade adjacente à identificação de indivíduos virgens no stock yellow, muito devido à parecença entre a tonalidade clara do corpo destes indivíduos e a falta de pigmentação dos indivíduos virgens.
Por fim, há que salientar a difícil distinção entre machos e fêmeas mesmo quando adultos. Uma vez que o tamanho do corpo e asas e a fusão dos segmentos abdominais, ou inexistência dela, nem sempre são objectivos, ou seja, claros, há que recorrer ao método mais fiável: a observação do pente sexual (existente apenas os machos), ou falta dele. No entanto, este nem sempre é muito visível obrigando a uma observação, nem sempre possível, mais detalhada do corpo dos indivíduos.

FUGA DE INDIVÍDUOS

Recentemente, ao abrir a estufa onde se encontram as moscas, deparámo-nos com um elevado número de moscas fora dos seus meios de cultura. Sem tempo a perder, apressámo-nos de forma a impedir a fuga de outros indivíduos, ainda dentro dos respectivos meios.
Sem outras hipóteses, concluímos rapidamente que a fuga se devia à má colocação do algodão na extremidade dos meios de cultura, ou mesmo, à possível utilização de algodão danificado. Assim sendo, e uma vez que não conseguimos identificar a origem da fuga, optámos por substituir todo o algodão que se encontrava em utilização.

Jovens Cientistas

Nos passados dias 22, 23 e 24 de Maio, participámos no Concurso "Jovens Cientistas e Investigadores". Um concurso desenvolvido, em Portugal, pela Fundação da Juventude, desde 1992, e tem por objectivo promover os ideais da cooperação e do intercâmbio entre jovens cientistas e investigadores, e estimular o aparecimento de jovens talentos nas áreas da Ciência, da Tecnologia, da Investigação e da Inovação, este ano realizado no Museu da Electricidade de Lisboa.

Não fomos premiados mas saímos vencedores, por termos sido seleccionados para, em conjunto com o projecto vencedor do concurso, representar a Escola.

Tratamento de PCB's

Como é sabido é ao nível dos cromossomas que se verificam as mutações que condicionam a expressão de determinados fenótipos (conjuntos de características visíveis manifestadas por cada ser).
No entanto, este fenótipo pode ser manipulado alterando as características manifestadas por cada ser, nomeadamente através da aplicação de produtos de elevada toxicidade, existentes no meio ambiente em grandes concentrações, os PCB’s. Os PCB’s, ou bifenis policlorados, foram utilizados em sistemas de refrigeração no anos 60 e retirados, posteriormente, do mercado devido aos elevados níveis de toxicidade que apresentam.
Numa terceira fase do nosso trabalho, dedicámo-nos à aplicação destes produtos durante a confecção da papa, que actua como alimento e meio das moscas.
Para a realização desta actividade utilizaram-se soluções contendo PCB’s em diferentes concentrações, que se misturaram com a papa que serve de alimento para a Drosophila melanogaster. Os ensaios realizados englobaram as concentrações de 3µm e 30µm bem como uma solução alcoólica aos quais se juntaram o controlo e o duplicado de todos os ensaios.
Até ao momento, os resultados obtidos verificaram-se tanto ao nível da taxa de mortalidade, como ao nível de alterações fenotípicas. Quanto à taxa de mortalidade, é evidente, em relação ao controlo, um acréscimo nos ensaios com concentração de 3µm, 30µm e na solução alcoólica, destacando-se de uma forma mais evidente, como seria de esperar, na concentração de 30µm.

Em relação a alterações fenotípicas, foram identificadas deformações em parte da descendência, nomeadamente ao nível da forma das asas, que se apresentavam danificadas, sendo provável que tal alteração resulte da toxicidade provocada pelos PCB’s.

Esperamos, numa fase mais avançada, observar alterações ao nível do ADN, e portanto, ao nível dos cromossomas, nos quais ocorra a fragmentação dos mesmos e consequente alteração do fenótipo.

Em busca dos cromossomas gigantes

Numa das muitas manhãs de investigações árduas e trabalhosas, um grupo, pessoas vulgares, jovens artistas com uma visão da ciência incrivelmente apurada, atingem o objectivo que os pode levar ao topo. Recentemente, mais precisamente no dia 21 de Fevereiro de 2008, após várias tentativas falhadas descobrimos os tão famosos cromossomas gigantes. Para encontrar experimentalmente estes cromossomas (que se encontram nas glândulas salivares das larvas de Drosophilas melanogáster) há que tomar certas precauções, como uma ligeira, mas também aprofundada pesquisa neste ramo.
Para quem simplesmente se limita a ver, pode parecer uma tarefa extremamente simples, em que se disseca uma mosca de mais ou menos 2 milímetros, decapitando-a até a cabeça estar totalmente separada do pequeno corpo, para iniciar a busca, mas cuidado para quem tem a visão pouco apurada pois pode se tornar uma tarefa difícil. Comecem por tratar esse assunto primeiro, só depois aprendam como um método assim tão simples se pode tornar complicado. Para começar o procedimento experimental, há que o preparar apropriadamente. Após a recolha do material necessário, inicia-se a experiência. Numa lamela coloca-se uma gota de soro, e ligeiramente ao lado, a larva (mas sem tocar). Com uma espátula imobiliza-se a larva aplicando um pouco de força., logo a seguir com um estilete desliza-se suavemente sobre a parte superior da larva (onde se encontram as mandíbulas) até ao soro. De seguida, no microscópio, procura-se as glândulas salivares, separando-as para seguidamente aplicar o corante, para então posteriormente partir em busca dos cromossomas.
Um processo em que na teoria parece fácil, mas na prática torna-se muito preciso, já que o objecto de trabalho é um ser cujo tamanho não nos favorece.
Podemos admitir que nem tudo nos correu bem nesta descoberta, várias larvas morreram em vão, mas tiveram sim um papel importante, pois assim adquirimos a experiência necessária para proceder da forma adequada.
Surge então a pergunta, de onde apareceram as informações necessárias?
Já que não é um tema muito conhecido pelo senso comum torna-se complicado encontrar essas mesmas informações. A nossa salvação foi a Internet, um meio que cada vez mais se torna indispensável na realização de muitos trabalhos, mas não basta um “clique” para se obter o que queremos. Tornou-se num contratempo pois foi muito complicado encontrar informações que sejam verídicas e não simplesmente inventadas por outrem.
Apesar de todas as desvantagens, conseguimos obter um ponto positivo nesta busca. Após a descoberta, um sentimento de satisfação, de alívio, e sobretudo de alegria por todos os nossos esforços saírem dali recompensados. Apercebemo-nos que nem tudo é tão vago e extraordinariamente grande, pois tudo é formado por coisas minimamente pequenas.
Como ponto final, temos que realçar a desilusão nas posteriores aulas, pois mais nenhuma vez conseguimos identificar e encontrar os cromossomas em questão, já que nem sempre o processo é realizado correctamente pois basta um mínimo erro durante o procedimento para o resultado final sair errado.

Mokidros

Recentemente integrámos a página do projecto Mokidros. Este projecto resulta do desenvolvimento de trabalhos do Instituto de Biologia Molecular e Celular (IBMC), e pretende aplicar esses trabalhos de investigação nas escolas. Com o Mokidros, o IBMC pretende divulgar uma nova ideia de participação na actividade científica e laboratorial na qual em muito contribui a disciplina de Área de Projecto. Assim, recorre-se com frequência ao modelo biológico Drosophila melanogaster. Ao fazer a compilação dos protocolos já existentes e associando a sua utilização em sala de aula, assumem o compromisso de complementar o ensino teórico com uma prática associada ao trabalho laboratorial.
Para tal, foram montadas, no ano lectivo de 2006/2007, uma estação de trabalho em cada escola envolvida no projecto com vista à criação e análise de moscas da fruta.

Visitem-nos em www.mokidros.ibmc.up.pt/actividades_experiencia_GJD.html

Dro quê?

O uso da Drosophila melanogaster como organismo experimental para o estudo genético começou em 1908 através do pesquisador norte-americano Thomas Hunt Morgan. Esta permitiu o desenvolvimento da genética moderna na medida em que, com este organismo, aprendeu-se a mapear os cromossomas, a medir os efeitos das radiações ionizantes sobre os mesmos, e a identificar aberrações cromossómicas.
Actualmente sabe-se que, cruzando indivíduos que diferem em características facilmente visíveis (como sejam o tamanho das asas, a cor dos olhos ou corpo) e estendendo esta análise às gerações seguintes, é possível determinar, ao fim de um mês, quais os alelos dominantes e recessivos e se o padrão de herança está, ou não, ligado ao sexo.

Quais as vantagens no estudo da Drosophila?

O sucesso da Drosophila ao nível da análise genética deve-se a vários factores:

• As fêmeas são muito fecundas (cada fêmea é capaz de produzir cerca de 200 a 300 descendentes);


• Fácil cultivo no laboratório;


• Ciclo de Vida curto;


• Produz grande descendência;


• Apresenta dimorfismo sexual, sendo fácil a distinção dos sexos;


• As culturas ocupam pouco espaço;


• Fácil manuseamento e observação;


• Reduzido número de cromossomas: 4 pares;


• Apresenta um grande número de mutantes.